荧光定量PCR（Quantitative PCR, qPCR）作为一种高灵敏度、特异性强的分子生物学技术，在生命科学研究、临床诊断、环境监测等领域发挥着重要作用。精确、高效的引物设计是荧光定量PCR成功的关键。本文将探讨荧光定量PCR引物设计的关键要素及策略。 #### 1. 引物长度和GC含量 - **长度**：引物通常推荐长度在18-30bp之间，过长或过短的引物可能影响其特异性或稳定性。 - **GC含量**：GC含量应保持在45%-55%之间，过高或过低的GC含量都可能导致引物间或引物